1、原理及适用范围

大肠杆菌（Escherichia coli）和大肠菌群（Coliform）都是存在于温血动物肠道和粪便的细菌，是条件性致病菌，主要造成水体污染，也可能引起食物中毒的发生。大肠杆菌大肠菌群快速检测片是一种预先制备好的一次性培养基产品，可以同时检测大肠杆菌和大肠菌群，含有大肠菌选择性培养基、冷水可溶性的吸水凝胶和半乳糖苷酶（GAL）和葡萄糖醛酸酶（GUD）指示剂。大肠杆菌显蓝色，其他大肠菌群显红色，蓝点加上红点为总的大肠菌群数。 本产品适合于食品及原料中大肠菌群的计数，如消毒牛乳、冷饮和调味品等样品的检测，也可用于表面的卫生检测。 执行标准：食品卫生微生物学检验大肠杆菌计数——PetrifilmTM 测试片法（GB/T 4789.38）。

2、操作方法

2.1、样品处理：取样品25mL（g）放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液（或生理盐水）的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液，用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL，注入含有9mL稀释液的试管内，振摇后成为1:100的样品匀液，依次往下稀释。

2.2、接种：一般食品选1～2个稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如饮用纯水和矿泉水等）可直接吸取原液进行检测。将大肠杆菌大肠菌群测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上，然后再将上层膜缓慢盖下，静置10s左右使培养基凝固，每个稀释度接种两片。同时做一片空白阴性对照。

2.3、培养：将测试片叠在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过12片。培养温度为36℃±1℃，培养15～24h。

3、结果判读

培养后大肠杆菌显蓝色，其他大肠菌群显红色，蓝点加上红点为总大肠菌群数。

4、计数原则及报告方式

4.1、选择菌落数在15～150个之间的纸片进行计数。

4.2、若两个稀释度的菌落数均在15～150之间，则取其平均菌落数乘以稀释倍数，即为每毫升（或每克）样品中的大肠菌群菌落形成单位数；

4.3、如果所有稀释度的测试片上的菌落数都小于15，则计数稀释度最低的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之；如果所有稀释度的测试片上均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之；

4.4、如果所有稀释度的菌落数都大于150，计数最高稀释度的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。计数菌落数大于150的测试片时，也可计数一个或两个具有代表性的方格内的菌落数，换算成单个方格内的菌落数后乘以20（滤纸区面积为20cm2），即为测试片上估算的菌落数。报告单位以CFU/mL（或CFU/g）表示。

5、附加说明

5.1、样品匀液的pH值应在6.5～7.5之间，必要时用1mol/L氢氧化钠（NaOH）或1mol/L盐酸（HCl）调节pH。

5.2、我国的食品卫生标准大多都以大肠菌群（Coliform）作为检测指标，而欧盟等许多国家则以大肠杆菌（E.coli）作为检测对象，因此，本产品对于出口食品和国际航空配餐等企业具有更广泛的应用前景。

6、保存条件

本产品需存放在4℃～10℃冰箱中，保质期为一年，铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好，放到冰箱中，一个月内用完。在高湿度的环境中可能出现冷凝水，最好在拆封前将整包回温至室温。